ABSTRACT
Introducción: La inmunoelectroforesis es una técnica de precipitación que permite la caracterización de muestras biológicas complejas. En el Departamento de Inmunología del Instituto de Ciencias Básicas y Preclínicas Victoria de Girón se cuenta con un antisuero hiperinmune obtenido por inmunizaciones de carneros contra proteínas totales séricas humanas y con otro antisuero anti IgA de calostro humano. Objetivo: Identificar IgG, IgM e IgA en suero humano y determinar respuesta anti IgM humana en el antisuero anti IgA de calostro humano obtenido en carnero. Material y Métodos: Se realizó un estudio observacional, descriptivo y transversal desde noviembre de 2017 hasta junio de 2018. Se desarrolló una inmunoelectroforesis de suero humano normal empleando el antisuero hiperinmune. Resultados: Se identificaron IgG, IgM e IgA además de albúmina y otras fracciones proteicas y se determinó respuesta anti IgM humana en el antisuero anti IgA de calostro humano obtenido en carnero. Conclusiones: Este trabajo permitió identificar y determinar la respuesta anticlases mayores de inmunoglobulinas en la muestra de estudio(AU)
Introduction: Immunoelectrophoresis is a precipitation technique that allows the characterization of complex biological samples. The Immunology Department of the Institute of Basic and Pre-Clinical Sciences Victoria de Girón has a hyperimmune antiserum obtained by immunization of sheep against human serum total proteins and it also has an anti-human IgA antiserum obtained from human colostrum. Objective: The aim of this study was to identify IgG, IgM and IgA in human serum and to determine response to anti-human IgM in human colostral IgA with antiserum obtained in sheep. Material and Methods: An observational descriptive cross-sectional study was conducted from November 2017 to June 2018. Immunoelectrophoresis of normal human serum was performed using hyperimmune antiserum. Results: These procedures allowed to identify IgG, IgM and IgA in addition to albumin and other protein fractions and to determine response to anti-human IgM in human colostral IgA with antiserum obtained in sheep. Conclusions: This work allowed us to identify and determine significant anti-class responses of immunoglobulins in the sample studied(AU)
Subject(s)
Humans , Animals , Immunoelectrophoresis/methods , Immune Sera/immunology , Antibody Affinity/genetics , Epidemiology, Descriptive , Cross-Sectional StudiesABSTRACT
SUMMARY Drug-induced liver injury (DILI) to flucloxacillin is rare and is classified as idiosyncratic, as it is dependent on individual susceptibility, unpredictable, and dose-independent. The authors present the case of a 74 - year - old man with a history of monoclonal gammopathy under investigation and alcoholic habits of 24 g/day, with asthenia, anorexia, nausea, abdominal discomfort, and fever with three days of evolution. He was treated with two courses of antibiotic therapy with flucloxacillin to erysipelas previously (3 months and 2 weeks before admission). Lab tests showed serum AST levels of 349 U/L, ALT 646 U/L, alkaline phosphatase 302 U/L, GGT 652 U/L, total bilirubin 3.3 mg/dL and direct bilirubin 2.72 mg/dL. Infectious, autoimmune, and metabolic causes were ruled out. Magnetic resonance cholangiopancreatography showed normal results. Liver biopsy showed mild multifocal (predominantly microvesicular) steatosis; marked changes in the centrilobular areas (sinusoidal dilatation, marked congestion, hemorrhage, and multifocal hepatocyte collapse); expansion of the portal areas with the formation of bridges; proliferated bile ducts and inflammatory infiltrate of variable density, predominantly mononuclear type. The HLA-B*5701 screening test was positive. Hepatic biochemical tests remain abnormal with a significative increase in total bilirubin, which reached levels of 24.1 mg/dL, with the development of jaundice, pruritus, and choluria. DILI was assumed, and the patient was treated with ursodeoxycholic acid. There was favorable evolution, without evidence of blood coagulation dysfunction or encephalopathy. The analytic normalization was, however, slow, with evolution to chronicity. The authors present this case to remind the possibility of moderate/severe drug-induced liver injury to flucloxacillin, an antibiotic commonly used in clinical practice and association with the HLA-B * 5701 allele reported in the literature.
RESUMO A hepatotoxicidade à flucloxacilina é rara e classifica-se como idiossincrática, uma vez que é dependente da suscetibilidade individual, não expectável e independente da dose. Apresentamos o caso de um homem, 74 anos, antecedentes de gamapatia monoclonal e hábitos alcoólicos de 24 g/dia, com quadro de astenia, anorexia, náuseas, desconforto abdominal e febrícula com três dias de evolução. Referência a dois ciclos de antibioterapia com flucloxacilina por erisipela (três meses e duas semanas antes da admissão). Analiticamente com AST 349 U/L, ALT 646 U/L, FA 302 U/L, GGT 652 U/L, bilirrubina total 3,3 mg/dL, bilirrubina direta 2,72 mg/dL. Excluídas etiologias infecciosa, autoimune, metabólica, bem como patologia das vias biliares por colangio-RM. Biópsia hepática mostrou esteatose multifocal ligeira (predominantemente microvesicular); alterações acentuadas nas áreas centrolobulares (dilatação sinusoidal, congestão acentuada, hemorragia e colapso multifocal de hepatócitos); expansão das áreas portais com constituição de pontes; ductos biliares proliferados e infiltrado inflamatório de densidade variável, predominantemente de tipo mononucleado. Tipagem de HLA-B*5701 positiva. Agravamento analítico atingindo bilirrubina total 24,1 mg/dL, com desenvolvimento de icterícia, prurido e colúria. Admitida a hepatotoxicidade, iniciou terapêutica com ácido ursodesoxicólico. Verificou-se evolução favorável, sem evidência de coagulopatia ou encefalopatia. A normalização analítica foi, no entanto, lenta, com evolução para cronicidade. Os autores apresentam este caso para alertar para a possibilidade de hepatotoxicidade moderada a grave à flucloxacilina, antibiótico de uso comum na prática clínica e associação com o alelo HLA-B*5701 relatada na literatura.
Subject(s)
Humans , Aged , HLA-B Antigens/drug effects , Chemical and Drug Induced Liver Injury/etiology , Chemical and Drug Induced Liver Injury/pathology , Floxacillin/adverse effects , Immunoelectrophoresis/methods , Risk Factors , Chemical and Drug Induced Liver Injury/enzymology , Liver/drug effects , Liver/pathologyABSTRACT
En la Unidad de Micología Médica del Hospital Universitario de Maracaibo se evaluaron 1982 pacientes, entre junio de 1984 y octubre de 1994. Se les practicó estudio micológico (Examen directo, cultivo y/o histopatología), así como pruebas inmunodiagnósticas: Inmunodifusió (ID), Inmunoelectroforesis (IEF) y Aglutinación del látex (AL). Esta última se utilizó para diagnosticar criptococosis, con el Crypto-Test. Se consiguieron 340 casos positivos (11,7 por ciento): 151 pacientes con Histoplasmosis (44,4 por ciento), 46 candidiasis (13,5 por ciento), 41 cromomicosis (12,0 por ciento), 25 paracoccidioidosis (7,3 por ciento), 20 coccidioidosis (5,9 por ciento), 19 criptococosis (55,6 por ciento), 17 aspergilosis (5,0 por ciento), 8 micetomas y 8 zigomicosis (2,3 por ciento cada una); 4 actinomicosis (1,2 por ciento) y 1 esporotricosis (0,3). El estudio micológico resultó positivo en 22,3 por ciento de las histoplasmosis, 67,7 por ciento de las candidiasis, 67,7 por ciento de las paracoccidioidosis, 73,0 por ciento de las coccidioidosis, 93,3 por ciento de las criptococosis y 73,3 por ciento de las aspergilosis. El inmunodiagnóstico resultó positivo en el 98,6 por ciento de las histoplasmosis, 94,1 por ciento de las aspergilosis y en el 100 por ciento de las candidiasis, paracoccidioidosis, coccidioidosis y criptococosis. La mayor parte de los pacientes provenían de los Municipios foráneos del Zulia y de los Estados vecinos (52,0 por ciento de las paracoccidioidosis venían de los Estados andinos y 32.0 por ciento de Falcón, de donde también provenían el 40,0 por ciento de las coccidioidosis). El 51,7 por ciento eran hombres y el 48,3 por ciento mujeres. Todos los pacientes con paracoccidioidosis eran hombres y 88,8 por ciento trabajaban en el campo. Clinicamente la mayoría presentó sintomatología pulmonar, con la excepción de la criptococosis en donde predominó la afectación del SNC (92,9 por ciento). El 60 por ciento de los pacientes con aspergilosis presentaron tuberculosis pulmonar previamente. Se comprobó que el inmunodiagnóstico es sencillo, eficaz y la utilización de antígenos específicos y sueros de referencia hizo más confiable el estudio. Además, la población zuliana pudo acceder por primera vez a un medio diagnóstico micológico seguro y de muy bajo costo
Subject(s)
Humans , Male , Female , Agglutination , Immunoelectrophoresis/methods , Immunoelectrophoresis/statistics & numerical data , Immunodiffusion/methods , Immunodiffusion , Mycoses/diagnosis , Mycoses/immunology , Mycoses/pathology , DermatologyABSTRACT
The stability of three allergens common in tropical countries was evaluated under different storage conditions. Prosopis juliflora (PJ), Rhizopus nigricans (RN), and wheat dust (WD), were taken as representatives of various groups of allergens viz, pollen, fungi and dust. The extracts were stored in buffer containing phenol (0.4%) or glycerol (50%) at temperatures ranging from 4-55 degrees C for 15 to 60 days. Protein content of PJ extract was reduced remarkably when it was stored at 40 degrees C for 45 days. Thin layer isoelectric focusing and rocket immunoelectrophoresis of PJ showed that certain antigenic proteins degrade rapidly even at 25 degrees C as early as day 15. However, two to three proteins of PJ remain stable at a higher temperature (40 degrees C) for two months. Relative radioallergosorbent test (RAST) inhibition showed substantial loss of allergenic activity in all the three extracts, when stored at higher temperatures (25-55 degrees C) even for short durations, i.e., 15 days. Extracts (PJ and RN) containing 50% glycerol were found to be stable, retaining more than 50% activity, even when stored at 55 degrees C for 40 days, while extracts without glycerol lost more than 75% of their allergenic activity. However, addition of glycerol did not change the stability of wheat dust allergenic extract. The present findings indicate that allergenic extracts behave differently when stored. Hence, the stability of each extract should be determined individually.
Subject(s)
Allergens/chemistry , Biological Products/chemistry , Drug Stability , Drug Storage , Immunoelectrophoresis/methods , Isoelectric Focusing/methods , Plant Extracts/chemistry , Pollen/chemistry , Radioallergosorbent Test/methods , Rhizopus/immunology , Temperature , Time Factors , Triticum/immunologyABSTRACT
A counterimmunoelectrophoresis test was used to detect antibodies against the adult worm antigen of Clonorchis sinensis in sera from 70 clonorchiasis patients, 20 uninfected healthy persons and 7 patients infected with other helminths. A constant voltage of 10 V/cm and a running time of 30 minutes was chosen in carrying out detection. Antibody titers of 1, 1:2 and 1:4 were obtained from 35, 21 and 14 clonorchiasis patients, respectively. Significant correlation was observed between worm burden in patients and antibody titer, the higher the antibody titer in patients, the more eggs per gram feces in their stool. Although cross reaction was observed with toxocariasis and angiostrongyliasis in this study, high (100%) sensitivity made it possible to screen the subjects in endemic areas to shorten the survey period.
Subject(s)
Animals , Antibodies, Helminth/analysis , Clonorchiasis/diagnosis , Clonorchis sinensis/immunology , Counterimmunoelectrophoresis/methods , Guinea Pigs , Humans , Immunoelectrophoresis/methods , Parasite Egg Count , TaiwanABSTRACT
Se realizó la purificación del FVIII/FvW a partir de un concentrado comercial que había pasado la fecha de vencimiento para su uso terapéutico y se obtuvo un inmunógeno el cual se administró a un conejo con el objetivo de obtener un antisuero contra esa proteína. El antisuero obtenido se purificó posteriormente mediante una cromatografía de afinidad antigenoanticuerpo. Con la utilización de estos métodos hemos logrado obtener un antisuero el cual se puede utilizar para la determinación cuantitativa de FVIII/FvW sin necesidad de imponer este reactivo
Subject(s)
Rabbits , Animals , Chromatography, Affinity , Factor VIII/isolation & purification , Immune Sera/therapeutic use , Immunoelectrophoresis/methods , von Willebrand Factor/isolation & purificationABSTRACT
Se estudiaron 33 niños con diagnóstico de toxoplasmosis ocular, en edades comprendidas entre 2 meses a 14 años. Todos los pacientes fueron valorados en el Servicio de Oftalmología del Instituto Nacional de Pediatría en donde clínicamente se realizó el diagnóstico de toxoplasmosis ocular. Posteriormente se efectuó reacción de inmunofluorescencia indirecta para detectar anticuerpos contra T. gondii y administración del medicamento específico. Se hizo revisión en cada caso, con en objeto de eliminar aquellos que tuvieran manifestaciones clínicas extraoculares, y se determinó, de esta manera, cual es su frecuencia por edad y sexo, cuales las manifestaciones oculares más constantes en estos pacientes y su correlación con los títulos de anticuerpos específicos contra T. gondii. Los resultados obtenidos en este trabajo indican que la toxoplasmosis ocular en los niños es más frecuente en edades comprendidas entre 1 a 4 y 5 a 9 años, en el sexo masculino. Los datos clínicos más frecuentemente encontrados fueron: en primer lugar, la retinocoroiditis unilateral, en segundo estrabismo, en tercero nistagmus y en cuarto retinitis. La correlación entre títulos de anticuerpos y manifestaciones clínicas indica que en las diversas manifestaciones que se presentan en la toxoplasmosis ocular, los títulos pueden encontrarse desde l:64 hasta 1:4096; sin embargo, el mayor número de casos cursaron con títulos compredidos en el rango de 1:1024 a 1:4096
Subject(s)
Infant , Child, Preschool , Child , Adolescent , Humans , Toxoplasmosis, Ocular/diagnosis , Toxoplasmosis, Ocular/epidemiology , Antibodies/analysis , Antibody Formation , Immunoelectrophoresis/methods , Toxoplasma/immunologyABSTRACT
Se utilizó la cromatografía DEAE celulosa a un pH 7,2 con solución amortiguadora Tris-HCL 0,1 M y utilizando un gradiente salino lineal con cloruro de sodio y resultó adecuada para separar fracciones antigénicas a partir de un extracto soluble de parásitos adultos de Dirofilaria immitis. Se lograron obtener 19 fracciones, una de las cuales presentó cierto grado de especificidad para la filariasis según los resultados obtenidos empleando la contrainmunoelectroforesis
Subject(s)
Animals , Chromatography, DEAE-Cellulose/methods , Filarioidea/isolation & purification , Immunoelectrophoresis/methods , Filariasis/diagnosisABSTRACT
Liver function tests and protein fractionations were studied in 12 cases diagnosed as hepatic amoebiasis. Abnormal values were detected in zinc turbidity, serum bilirubin, more apparent in S. alkaline phosphatase, S.G.P.T. and L.D. Hypo-al buminaemia occured in all cases and was associated with increased gamma, beta and alpha[2], globulins. Improvement in liver functions after treatment was noticed in S.G.P.T., lactic dehydrogenase and serum alk. phosphatase, with significant improvement in serum albumin and beta globulin